Detection of F8 mutations in carriers and patients with severe hemophilia A: Identification of a novel mutation / Detección de mutaciones en el gen F8 en mujeres portadoras y en pacientes con hemofilia A: Identificación de una mutación nueva

The molecular diagnosis of haemophilia A (HA) patients has many benefits including diagnosis confirmation and inhibitor risk development prediction. In female carries of a mutation, the molecular diagnosis allows for genetic counseling and prenatal diagnosis, which have become part of the comprehensive care for HA in many countries. Therefore, the aim of this study was to determine the F8 mutations in severe HA (sHA) patients and female carriers. In 12 patients with sHA, the presence of the intron 22 and intron 1 inversions was investigated using an inverse and a conventional PCR method, respectively. In patients negative for the inversions, the F8 gene was screened through conformation sensitive gel electrophoresis (CSGE) and further sequencing. The causative mutation was successfully identified in 6/12 patients, including the novel mutation p.G190C. The mothers of these six patients and those of seven other sHA patients molecularly diagnosed in a previous work were investigated for the presence of the genetic alterations found in their sons. All mothers were found to be carriers. This is the first study conducted in Venezuela which directly analyzes the F8 gene in potential carrier mothers to specifically identify the presence of the mutation that was detected in their sons, and complements a previous study on sHA patients. Our findings will facilitate the implementation of regular screening of HA carriers in our country and will allow a better care of bleeding symptoms and genetic counseling.

El diagnóstico molecular de pacientes con hemofilia A (HA) tiene múltiples beneficios, incluyendo la confirmación del diagnóstico y la predicción del riesgo de desarrollar inhibidores. En mujeres portadoras de una mutación, el diagnóstico molecular permite el consejo genético y el diagnóstico prenatal, los cuales son parte de la atención integral de HA en muchos países. Así, el objetivo de este estudio fue determinar mutaciones en el gen F8 en pacientes con HA severa (HAs) y en mujeres portadoras. En 12 pacientes con HAs, la presencia de la inversión del intrón 22 y el intrón 1 fue investigada utilizando una PCR inversa y una convencional, respectivamente. En pacientes negativos para cualquiera de las inversiones, el gen del F8 fue analizado a través de la técnica de electroforesis en gel sensible a conformación (CSGE) y posterior secuenciación. La mutación causante de la enfermedad fue identificada en 6/12 pacientes, incluyendo la mutación nueva p.G190C. Las madres de estos seis pacientes y las de otros siete pacientes de HAs diagnosticados en un estudio previo y fueron investigadas para la presencia de alteraciones genéticas encontradas en sus hijos. Todas las madres resultaron ser portadoras. Éste es el primer estudio realizado en Venezuela donde se analiza directamente el gen F8 en portadoras potenciales para identificar específicamente la presencia de una mutación que fue detectada en sus hijos, y complementa un estudio previo con pacientes HAs. Nuestros hallazgos facilitarán la implementación del análisis regular de portadoras de HA en nuestro país y permitirán un mejor cuidado de los síntomas de sangrado y consejo genético.

Relación entre la ingesta de antioxidantes, factores nutricionales e indicadores bioquímicos en voluntarios sanos / Relationship between antioxidant intake, nutritional factors and biochemical indicators in healthy volunteers

El estrés oxidativo constituye un factor importante en el desarrollo de Enfermedades Cardiovasculares (ECVs) debido a los daños graves que provocan las especies reactivas de oxígeno en las biomoléculas, por lo que el consumo adecuado de vitaminas con propiedades antioxidantes podría prevenir o retrasar la aparición de estas enfermedades. El objetivo de este trabajo fue determinar la relación entre la ingesta de antioxidantes, factores nutricionales y marcadores bioquímicos en un grupo de individuos sanos de Caracas, Venezuela. El estudio incluyó 29 participantes entre 18-40 años de edad a los cuales se les realizó tres recordatorios dietéticos de 24h, mediciones antropométricas [peso, estatura, circunferencia de cintura (CC), índice cintura cadera (ICC) y % grasa corporal (% GC)] según normativa del Programa Internacional de Biología (IBP). Adicionalmente, se determinó el perfil lipídico y la concentración de 8-isoprostano como marcador de estrés oxidativo. Los participantes tomaron 1 cápsula diaria de vitaminas antioxidantes por 30 días. Posterior al tratamiento con antioxidante, no hubo cambios significativos en las concentraciones de triglicéridos (TG), colesterol total (CT), colesterol de las lipoproteínas de baja densidad (c-LDL) y colesterol de las lipoproteínas de alta densidad (c-HDL). Por su parte, el 8-isoprostano registró una correlación significativa entre antes y después del tratamiento (r=0,374; p<0,05); siendo el mayor descenso en los individuos que presentaron mayor % GC y CC. Los hallazgos sugieren que el suplemento de antioxidantes tiende a disminuir el estrés oxidativo en un corto período de tiempo, particularmente en individuos con mayor % GC, previniendo el desarrollo de ECVs(AU)

Oxidative stress is an important risk factor for the development of cardiovascular diseases (CVD) due to the serious damage caused by reactive oxygen species to biomolecules, thus, adequate intake of vitamins with antioxidant properties could prevent or delay the onset of these diseases. The aim of this study was to determine the relationship between antioxidant intake, nutritional factors and biochemical markers in a group of healthy individuals in Caracas, Venezuela. The study included 29 participants between 18-40 years of age who underwent three 24-hour dietary recalls, anthropometric measurements [weight, height, waist circumference (WC), waist-hip ratio (WHR) and % body fat (% BF)] according to the International Biology Program (IBP) methodology. In addition, the lipid profile and the concentration of 8-isoprostane as a marker of oxidative stress was determined. The participants took one daily capsule of antioxidant vitamins for 30 days. After treatment with antioxidants, no significant changes in triglyceride (TG), total cholesterol (TC), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) and high density lipoprotein cholesterol (HDLC) levels were observed. Meanwhile, the 8-isoprostane recorded a significative correlation between before and after treatment (r=0.374; p<0.05). The decline in 8-isoprostane levels was more evident in those individuals with the highest % BF and WC. These findings suggest that antioxidant supplementation decreases oxidative stress in a short period of time, particularly in higher % BF individuals, and might help prevent CVDs(AU)